全國(guó)服務(wù)咨詢熱線:

15221734409

article技術(shù)文章
首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 成年小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞原代培養(yǎng)

成年小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞原代培養(yǎng)

更新時(shí)間:2024-03-19      點(diǎn)擊次數(shù):466



1. C57小鼠,8-10周,通過(guò)頸椎脫位處死浸入75%乙醇浸泡5分鐘,轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤(pán)中。

2. 使用眼科剪和鑷子,使髖關(guān)節(jié)脫臼,保持股骨頭完整。

3. 用止血鉗去除每個(gè)股骨頭的軟骨帽,將組織放入含2%雙抗的PBS中。

4. 用冰冷的含2%雙抗的PBS清洗2-3遍,將關(guān)節(jié)軟骨小心移到2ml離心管中。

5. 用眼科剪刀將軟骨帽剪成約1mm3的碎片,加入3ml預(yù)熱的Collagenase D1.5mg/ml)。

6. 放入37℃、80rpm的搖床中進(jìn)行第一次消化,時(shí)間2h

7. 第一次消化結(jié)束后,加入含血清的培養(yǎng)基終止消化,40um的細(xì)胞篩過(guò)濾后,離心1500rpm2min。

8. 沉淀用DMEM培養(yǎng)基重懸,計(jì)數(shù),種植在24孔板中。

9. 在未消化的組織中加入3ml預(yù)熱的Collagenase D,放入37℃、80rpm的搖床中進(jìn)行第二次消化,時(shí)間2h,然后收集細(xì)胞。


伊萊博生物科技(上海)有限公司
地址:上海市寶山區(qū)長(zhǎng)江南路180號(hào)B區(qū)650室
郵箱:yilaibo@shyilaibo.com
關(guān)注我們
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號(hào)了解更多信息:
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號(hào)
了解更多信息