細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞培養(yǎng)是怎樣的呢?
更新時間:2021-12-13 點(diǎn)擊次數(shù):499
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ),就是養(yǎng)好細(xì)胞,同事的那句話,話雖糙,但理卻確實(shí)是這么個理。細(xì)胞跟人其實(shí)是一樣一樣的,人有高矮胖瘦,脾氣秉性不盡相同,細(xì)胞也是如此,他們的形態(tài),包括圓形、梭形、桿狀、星形、多邊形或是其他不規(guī)則形狀,主要“食物”是DMEM跟1640,就跟我們?nèi)祟惖拿罪埜媸骋粯?,也有其他一些不太常?guī)的,比如F12、L15、McCoy's5A等,一般情況下(特定的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模枰M(jìn)行細(xì)胞馴化的除外),不建議更換培養(yǎng)基品類
1、取材在無菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞(視實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ǎ?,?jīng)過的處理(如消化分散細(xì)胞、分離等)后接入培養(yǎng)器血中,這一過程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無取材這一過程。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的*培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。
2、培養(yǎng)將取得的組織細(xì)胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng)。
3、凍存及復(fù)蘇(可參閱后面有關(guān)章節(jié))為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度-196℃,將細(xì)胞收集至凍存管中加入含保護(hù)劑(一般為二甲亞砜或甘油)的培養(yǎng)基,以的冷卻速度凍存,終保存于液氮中。在較低的溫度下,細(xì)胞保存的時間是無限的。復(fù)蘇一般采用快融方法,即從液氮中取出凍存管后,立即放入37℃水中,使之在一分鐘內(nèi)迅速融解。然后將細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)器皿中進(jìn)行培養(yǎng)。