簡要描述:慢性支氣管炎動(dòng)物模型:慢性支氣管炎(chronic bronchitis,CB)是一種十分常見的慢性炎癥,集中發(fā)作于氣管、支氣管黏膜及周圍組織。
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慢性支氣管炎動(dòng)物模型動(dòng)物的選擇
考慮到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的繁殖周期、實(shí)驗(yàn)成本、動(dòng)物基因組研究進(jìn)程等多種因素,大鼠、小鼠、豚鼠等廣泛應(yīng)用于CB模型。
慢性支氣管炎動(dòng)物模型造模方法
一、煙熏法
煙熏法多以單一煙絲或混合煙霧材料(如煙葉、鋸末、刨花各50g)為刺激物置于特制煙室制備CB模型。
造模方法:選用大鼠或小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,30~50min/次,2~4次/d,持續(xù)28~60d。
結(jié)果顯示模型組小鼠氣道上皮出現(xiàn)大量炎細(xì)胞浸潤,腺體分泌功能亢進(jìn),有黏液栓形成,肺泡灌洗液中白細(xì)胞總數(shù)和中性粒細(xì)胞數(shù)量明顯增加,蛋白含量上調(diào),血漿和肺組織勻漿的超氧化物歧化酶活性和總抗氧化能力降低,丙二醛( MDA) 含量增加。
優(yōu)點(diǎn):煙熏法致CB模型的建立呈漸進(jìn)性發(fā)展,簡便可靠,炎癥病變確切,有助于研究CB發(fā)生發(fā)展過程中各階段的病理變化以及相應(yīng)炎細(xì)胞浸潤及炎性標(biāo)志物的變化,為臨床早期診斷和治療提供理論依據(jù)。
缺點(diǎn):致煙劑原料種類單一,其燃燒產(chǎn)生的煙霧濃度難以控制,且實(shí)驗(yàn)周期較長,穩(wěn)定性較差。
二、化學(xué)藥物法
多種化學(xué)藥物能夠引發(fā)CB,常見的藥物有二氧化硫、氯氣、氨水和脂多糖(LPS)。
1
二氧化硫吸入法
造模方法:選用大鼠及小鼠作為實(shí)驗(yàn)對象,將不同濃度的二氧化硫置于玻璃鐘罩或者特制熏箱,將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分批放入進(jìn)行10s~30min熏制,1次/d,全程 15~28d。
優(yōu)缺點(diǎn):本方法能夠引起CB的病理變化,病情發(fā)展嚴(yán)重后甚至導(dǎo)致氣流阻塞并發(fā)肺氣腫。本方法快速簡易,但對氣管及支氣管的刺激性較大,過量的二氧化硫會(huì)引起呼吸道黏膜燒灼傷,上皮細(xì)胞增生壞死,容易導(dǎo)致動(dòng)物模型發(fā)生急性損傷甚至死亡,故選用合適的濃度以及建立過程,使氣道損傷程度適中尤為重要。
2
氨水霧化法
造模方法:選取小鼠作為實(shí)驗(yàn)對象,2min/次,每次間隔0.5h,5次/d,連續(xù)10d,10d后采用氨水霧化2min/次,每次間隔0.5h,2次/d,連續(xù)20d,全程總共30d。
模型組咳嗽次數(shù)明顯增加、支氣管黏膜上皮細(xì)胞空泡變性增生、細(xì)支氣管皺縮、炎性細(xì)胞浸潤、纖毛發(fā)生倒伏脫失、部分肺泡隔斷裂成肺大泡、管腔大量漿液滲出及肺間質(zhì)血管擴(kuò)張淤血。
優(yōu)缺點(diǎn):本方法簡便易行,但在實(shí)施過程中污染較大。
3
氯氣吸入法
暴露于低濃度的氯會(huì)優(yōu)先對大呼吸道造成損害,而對肺泡損害較弱,從而造成廣泛氣道損害。高濃度的氯(800g/m3、5min) 會(huì)直接導(dǎo)致呼吸道和肺泡雙重?fù)p傷進(jìn)而導(dǎo)致急性氣道炎癥反應(yīng)的發(fā)生。由于氧化應(yīng)激標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)以及低分子量抗氧化劑對異常情況的緩解,進(jìn)而證明氯氣對氣道造成的損害本質(zhì)上是氧化性的。
4
LPS注射法
LPS是蛋白質(zhì)、類脂質(zhì)及多糖的復(fù)合物,也是重要的致炎因子,可引起氣道上皮損傷,激活炎性細(xì)胞并釋放炎性因子,誘導(dǎo)氣道炎癥。
造模方法:選用小鼠或大鼠作為實(shí)驗(yàn)對象,采用氣管滴注等方法制備CB動(dòng)物模型。
優(yōu)缺點(diǎn):本方法簡單經(jīng)濟(jì)、易定量、耗時(shí)短且污染較少。由于LPS注射法具有足夠的刺激強(qiáng)度,同時(shí)又考慮到人類CB的發(fā)病機(jī)制,故可成功復(fù)制出CB的動(dòng)物模型。其缺點(diǎn)是LPS過量會(huì)導(dǎo)致急性肺損傷改變,不利于CB的階段性觀察,故前期造模條件的摸索尤為重要。
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