簡要描述:石蠟樣本TUNEL檢測技術(shù)服務(wù)是伊萊博生物實驗組成之一,作為常見實驗,日常實驗之一。該實驗由從事動物實驗專業(yè),經(jīng)驗豐富的人員進行操作。
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TUNEL 法的實驗原理
基本原理:對不同組織切片先增加細胞膜通透性,然后讓 rTDT 和生物標(biāo)記的 dTUTP 進入細胞內(nèi),在 rTDT 的輔助下 dTUTP 與核斷裂的 DNA 3』-OH 結(jié)合,再用 HRP 標(biāo)記的鏈霉親和素與 dTUTP 上的 biotin 結(jié)合(每個鏈霉親和素至少可以再結(jié)合 3 個 biotin 分子),后用 DAB、過氧化氫與 SP 上的辣根過氧化物酶 HRP 發(fā)生氧化、環(huán)化反應(yīng),形成苯乙肼聚合物而呈現(xiàn)棕褐色,終通過計數(shù)每張切片上不同視野中 TUNEL 陽性細胞的比例來判斷細胞凋亡發(fā)生情況。
石蠟樣本:取下適當(dāng)?shù)男迈r的組織塊固定于4%-10%濃度的多聚甲醛或中性甲醛中,甲醛與組織塊體積比在10:1和20:1之間,4攝氏度保存運輸;
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