簡(jiǎn)要描述:冰凍切片TUNEL檢測(cè)技術(shù)服務(wù)是伊萊博生物實(shí)驗(yàn)組成之一,作為常見實(shí)驗(yàn),日常實(shí)驗(yàn)之一,該實(shí)驗(yàn)由從事病理實(shí)驗(yàn)專業(yè),經(jīng)驗(yàn)豐富的人員進(jìn)行操作。
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TUNEL 法的實(shí)驗(yàn)原理
基本原理:對(duì)不同組織切片先增加細(xì)胞膜通透性,然后讓 rTDT 和生物標(biāo)記的 dTUTP 進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),在 rTDT 的輔助下 dTUTP 與核斷裂的 DNA 3』-OH 結(jié)合,再用 HRP 標(biāo)記的鏈霉親和素與 dTUTP 上的 biotin 結(jié)合(每個(gè)鏈霉親和素至少可以再結(jié)合 3 個(gè) biotin 分子),后用 DAB、過(guò)氧化氫與 SP 上的辣根過(guò)氧化物酶 HRP 發(fā)生氧化、環(huán)化反應(yīng),形成苯乙肼聚合物而呈現(xiàn)棕褐色,終通過(guò)計(jì)數(shù)每張切片上不同視野中 TUNEL 陽(yáng)性細(xì)胞的比例來(lái)判斷細(xì)胞凋亡發(fā)生情況。
冰凍切片:取下的新鮮組織應(yīng)立即放入超低溫冰箱或者液氮中,用干冰運(yùn)輸,固定好的切片應(yīng)于-80或者-20度保存,并盡快用于檢測(cè);
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